新蛋白定位,蛋白质定位数据库

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• 1、请教一种新蛋白的研究思路
• 2、如何应用细胞生物学技术初步阐明一个新蛋白的定位和功能
• 3、已知基因序列的新蛋白的细胞内定位研究方法?

请教一种新蛋白的研究思路

研究思路取决于研究的方向，一般来说需要先提纯出来，然后获得基因序列。蛋白质序列的检索往往是进行相关分析的第一步，由于数据库和网络技校术的发展，蛋白序列的检索是十分方便，将蛋白质序列数据库下载到本地检索和通过国际互联网进行检索均是可行的。接着就是做一些蛋白质基本性质分析、跨膜区分析、卷曲螺旋分析、前导肽与蛋白质定位、蛋白质功能预测等等

如何应用细胞生物学技术初步阐明一个新蛋白的定位和功能

随着分子生物学的进展,新基因功能的研究手段不断增多.现从生物信息学分析、离体与在体和基因编码蛋白相互作用方面综述近年来有关新基因功能研究的进展,为基因工程等相关领域的研究提供参考.各种方法都有各自的特点和局限性,研究者可根据不同目的筛选最合适的方法,实现对特定基因功能研究的目的.免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种，是将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。

已知基因序列的新蛋白的细胞内定位研究方法?

既然是已只基因序列,那么就在vitro(体外)环境下,合成这种蛋白质,然后把这些蛋白质用荧光标记,或者放射性标记(radio label),然后把这些蛋白质重新注射回细胞内,然后跟踪标记就行了.

大体思路就是这样了,中间一些技术细节还需要再讨论.

但是有一点,我想不太通,就是如果这里的蛋白质是真核生物的蛋白质的话,就设计到初步转录后的splicing以及post modification,而这两步是在vitro环境下无法完成的,所以如果是真核蛋白质的话,需要利用plamids把这段基因整合到yeast里,然后然yeast来生产新蛋白,然后再进行标记.

抱歉,生物学到后面大多都用英文的表达方式了,中文翻译表达可能有点不是很准确,所以直接用英文了,请见谅.